期刊简介

               本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。                

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  • 杂志名称:军事医学杂志
  • 主管单位:军事医学科学院
  • 主办单位:军事医学科学院
  • 国际刊号:1674-9960
  • 国内刊号:11-5950/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
军事医学杂志2001年第03期

抗人红细胞单链抗体基因的克隆与表达

司炳银;祝庆余

关键词:单链抗体, 序列分析, 基因表达
摘要:目的:获得抗人红细胞单链抗体(single-chain antibody, ScFv)基因,并在大肠杆菌中表达具有能与人红细胞特异性结合的ScFv.方法:以从分泌抗人红细胞单克隆抗体细胞株中提取细胞的总RNA为模板,利用扩增鼠源性抗体可变区基因的通用引物,通过RT-PCR分别获得轻链(VL)、重链(VH)可变区基因,并通过15个氨基酸的连接肽(Gly4Ser)3按VL-接头-VH的顺序连接起来,组建成ScFv基因.结果:核苷酸序列分析证明,获得的单链抗体基因VH基因属于小鼠抗体重链可变区基因家族的V(A)组,VL基因属于小鼠抗体κ轻链可变区基因家族的IV组.与pGEX-5X-3表达载体上的GST融合蛋白表达后,在相对分子质量54?000处有一明显的空载体对照没有的蛋白带(ScFv 28000, GST26000).间接免疫荧光证明该表达产物能与人红细胞特异性结合.结论:获得了抗人红细胞ScFv基因和具有抗体活性的抗人红细胞ScFv,为建立患者自身红细胞凝集试验奠定了基础.