壳聚糖无纺布敷料对大鼠烧伤创面的促愈作用研究

摘要：壳聚糖是甲壳质的脱乙酰基产物，是一种多糖物质，其化学名为β（1-4）-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖。据文献报道，壳聚糖对伤口愈合有一定的促进作用［1］，并可能有止血作用［2］。本研究旨在动物皮肤烧伤创面愈合模型上，对我院卫生装备研究所研制的壳聚糖无纺布敷料对烧伤创面的作用及其机制作一探讨，并与临床常用敷料作对照，为临床提供新型、实用、经济、效佳的敷料提供实验依据。1 材料和方法 雌性Wistar大鼠48只（由军事医学科学院动物中心提供），随机分为包扎组（30只）和暴露组（18只）。以2%戊巴比妥钠(30 mg/kg 体重)腹腔注射麻醉后，经背部脱毛（8%硫化钠），以70%酒精棉球消毒，然后以TWD恒温可调电烫仪（成都飞机制造公司生产）在温度80℃、8 s作用时间下，沿脊柱上下烫两个圆形深二度创面，创面之间间隔2 cm。烫头直径为2.5 cm，压力为1 kg。烫完后以70%酒精消毒，暴露组直接放入单笼饲养，包扎组将近头部的创面敷以无菌壳聚糖无纺布2层，近尾部创面敷以无菌凡士林油纱布2层，然后外包以无菌纱布6层，单笼饲养。 分别于伤后3，6，9，14，21和28 d各活杀5只（包扎组）及3只（暴露组）动物取材，部分标本（创面肉芽组织）经冷冻后留测羟脯氨酸含量［3］，其余以福尔马林固定，经石蜡包埋，切片后行HE染色。于上述各时间点将动物创面大小描印于透明薄膜上，以Leica QTM970型图像分析仪测算其面积。2 结果2.1 宏观观察 观察期间所有动物全部存活。创面平均面积变化：暴露组伤口愈合较快，而包扎组伤口愈合较慢。伤后9 d和21 d壳聚糖包扎组创面平均面积小于油纱布包扎组面积。2.2 光镜观察结果 伤后3d：烫伤部位表皮、真皮呈半均质状，毛囊结构完全破坏，胶原纤维变性，真皮深层与肌层间有充血、出血现象。各组均可见少量成纤维细胞和中性粒细胞出现于伤口底部组织中，表皮细胞亦开始增殖、移行。3组之间比较差别不明显。 伤后6 d：各组创面底部组织中肉芽组织灶开始形成，并可见伤口周围表皮细胞增殖、移行。各组间未见明显差异。 伤后9 d：各组创面均形成肉芽组织层。其中以暴露组肉芽组织层厚，成纤维细胞和新生血管数量亦多（+++）（图1A）；壳聚糖包扎组肉芽组织层略薄（++）（图1B）；而油纱布组仅出现较大的肉芽组织灶，成纤维细胞和新生血管数量少（+）（图1C）。 伤后14 d：各组创面肉芽组织层继续增厚。仍以暴露组为厚，新生肉芽组织及新生表皮细胞分化亦为成熟；壳聚糖组肉芽组织层较薄，其中成纤维细胞和新生毛细血管增殖较旺盛；油纱布包扎组肉芽组织含量明显少于壳聚糖包扎组。 伤后21 d：暴露组创面已愈合，表皮细胞层较薄，成纤维细胞变得细小，胶原纤维束较多；壳聚糖包扎组肉芽组织层已基本填补组织缺损，但表皮细胞层尚未完全覆盖创面，肉芽组织中胶原纤维束已较明显；油纱布包扎组伤口内肉芽组织层急剧增厚，已大部填充组织缺损，但其中胶原纤维含量较少。2.3 伤口肉芽组织中羟脯氨酸含量的测定 在伤后9，14，21和28 d，羟脯氨酸平均含量均以暴露组为高，壳聚糖组次之，而以油纱布对照组含量低。