期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
HCMV gp52基因的克隆与表达
方毅;司炳银;张雨;祝庆余
关键词:人巨细胞病毒, 克隆与表达, gp52蛋白, 聚合酶链反应, 基因表达, 酶联免疫吸附测定
摘要:目的:克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)gp52基因,制备特异性抗原,用于HCMV早期诊断.方法:从感染的HCMV细胞上清液中提取病毒的DNA, 用PCR扩增gp52蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA片段,并将其克隆到pGEM-Teasy载体测序,然后将其克隆到含有谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-5X-3中表达,表达产物经GST亲和层析柱纯化后,采用ELISA和免疫印迹(Western blotting)检测重组蛋白的抗原性.结果:经序列测定gp52基因片段的序列正确,并在pGEX-5X-3表达载体中得到了高效表达.表达的融合蛋白用亲和层析柱纯化后经免疫印迹和ELISA分析具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清呈特异性反应.结论:通过基因工程制备的重组gp52蛋白可作为抗原用于HCMV感染者的早期诊断.
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