期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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首页>军事医学杂志
- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
一种新的GFP/DNA双标记流式细胞技术
董波；饶亚岚；鲁茁壮；王澜；从玉文；陈肖华；张军权；高荣莲；王治东；毛秉智
关键词：细胞周期, 流式细胞术, 绿色荧光蛋白, 基因表达, 转染
摘要：目的:为了检测细胞转染了带绿色荧光蛋白(GFP)标记的融合基因后细胞周期的改变,以研究目的基因与细胞周期的关系,建立GFP/DNA双标记流式细胞技术.方法:①以小鼠脾细胞为模型,以不同浓度的多聚甲醛(PFA)预固定细胞不同时间,再换用70%乙醇固定细胞24 h以上,观察不同固定方法对细胞周期检测的影响;②以Ad-EGFP感染的Hep-2细胞为模型,观察不同固定方法对细胞周期、GFP阳性细胞检出率和GFP的荧光强度的影响;③用佳固定方法观察转染p21/WAF1/CIP1-EGFP融合基因的293细胞的细胞周期,以验证方法的可靠性.结果:0.5%PFA预固定60 min,再换用70%乙醇固定细胞,不影响细胞周期检测,而且GFP荧光强度和转染效率的检测佳.以此方法固定细胞,GFP/DNA双标记流式细胞技术检测了转染p21/WAF1/CIP1-EGFP融合基因的293细胞的细胞周期,可观察到p21表达阳性的细胞发生了G0/G1期阻滞.结论:优化的细胞固定方法可以有效地阻止GFP从细胞内流出,建立的GFP/NDA双标记流式细胞技术可以用于研究带GFP标签的基因表达蛋白与细胞周期的关系.
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