期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
重组肉毒毒素E(BoNT/E)重链C端的表达、纯化及其抗原性分析
贾宏丽;杨利敏;王景林;康琳;王利春;孙嗣梅
关键词:肉毒毒素E, 克隆, 表达, 固定化金属螯合亲和层析(IMAC), 抗原性
摘要:目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素E重链C端(BoNT/EHC2)保护性抗原片段,为BoNT/E的抗体制备和检测方法的建立奠定基础.方法:采用PCR扩增BoNT/EHC2基因,插入表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3)pLysS获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/EHC2的抗原性.结果:表达工程菌pET28a-EHC2/BL21(DE3)pLysS于37℃用0.2 mmol/L IPTG诱导6 h,表达的目的蛋白可以达到全菌蛋白的37.9%.经过固定化金属螯合亲和层析一步纯化,rBoNT/EHC2的纯度可达95%以上.Western印迹和间接ELISA显示其具有良好的抗原性.结论:首次克隆、表达并纯化了BoNT/EHC2片段,并可被抗天然BoNT/E马血清所识别,为制备相应的抗体及建立快速检测方法做好了准备.
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