期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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首页>军事医学杂志
- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
大鼠羧肽酶原B在毕赤酵母中的表达与培养条件优化
王德解；李彦英；陈宏；方宏清；陈惠鹏
关键词：羧肽酶B, 毕赤酵母, 醇氧化酶启动子, 发酵培养
摘要：目的:利用毕赤酵母表达系统,表达大鼠羧肽酶原B(procarboxypeptidase B,proCPB)蛋白,同时探讨优表达条件,为规模化发酵生产羧肽酶B奠定基础.方法:以RT-PCR法从SD大鼠胰腺细胞中克隆了proCPB基因,将其插入pPIC9载体,转入毕赤酵母Gs115细胞,在甲醇的诱导下表达目的蛋白.结果与结论:首次实现了proCPB在毕赤酵母中的成功表达;通过表达条件的优化,使用BMGY(pH6.0)培养基,添加0.5%(体积比体积)的酪蛋白水解物和3 mmol/L的PMSF,于28℃,每隔12 h补加0.5%(体积比体积)的甲醇,重组酵母Gs115-proCPB表达的重组蛋白可达500 mg/L,表达的目的蛋白占总蛋白的94%,活化后的重组CPB相对分子质量为35.1×10 3,与理论值(35.2×10 3)极相近.活性测定表明,重组proCPB活化后的CPB的比活力可达110 U/mg(CPB参照品为180 U/mg).
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