期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
ST8SiaV基因启动子的克隆及功能鉴定
夏丽萍;陈付学;宋红生;赵翠萍;余涛;文铁桥
关键词:ST8SiaV基因, 启动子, pGL3-Basic质粒, pGL3-Basic-GFP表达载体, 聚合酶链反应
摘要:目的:克隆ST8SiaV基因启动子及构建ST8SiaV基因启动子-pGL3-Basic-GFP表达载体,并对该载体进行功能鉴定.方法:①基于NCBI公布的大鼠基因组ST8SiaV基因序列,以SD大鼠肝基因组DNA为模板,采用PCR方法,扩增ATG起始密码子上游1.7 kb片段.②分离、纯化PCR产物,与pMD 18-T载体相连,构建克隆载体,转化大肠杆菌(DH5α),筛选阳性克隆并测序.③启动子片段进行SacⅠ和BglⅡ双酶切,克隆进pGL3-Basic质粒载体.为探索该基因在神经干细胞分化过程的活体表达,将pGL3-Basic的luciferase报告基因替换为GFP,构建成promoter-pGL3-Basic -GFP表达载体.④将构建的表达载体电转染SD大鼠神经干细胞,对该表达载体进行生物学功能鉴定.结果与结论:成功地克隆到1.7 kb的具有生物学活性的ST8SiaV基因启动子,并构建了适于活体研究的promoter-pGL3-Basic-GFP表达载体,为进一步研究该基因的启动子区转录及调控作用奠定了基础.
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