期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a的克隆表达及其cDNA序列分析
王怡;孙萍;詹林盛;宋丽洁;李晖;孙红琰
关键词:核糖体, luffin-a, 序列分析, DNA, 金属离子亲和层析, 基因表达
摘要:目的: 从丝瓜籽中克隆核糖体失活蛋白luffin-a 基因,并在原核系统进行表达.方法: 根据已报道的cDNA 序列设计引物,用RT-PCR 的方法从成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a 基因,克隆后鉴定核苷酸序列.构建表达载体pET-28a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21 (DE3) ,并经IPTG 诱导表达.利用金属离子亲和层析的方法纯化所得目的蛋白.结果: 克隆的luffin-a 基因及其所编码的氨基酸序列与国外报道的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分别为95%和92% ,因而所获得的luffin-a基因是丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a一个新的cDNA序列.经SDS-PAGE分析: luffin-a 主要存在于包涵体中.金属离子亲和层析可纯化目的蛋白.结论: 本研究成功地克隆了luffin-a 一个新的序列,并建立了该蛋白的原核表达系统,同时利用亲和层析可一步法纯化获得目的蛋白.
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