期刊简介

               本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。                

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  • 杂志名称:军事医学杂志
  • 主管单位:军事医学科学院
  • 主办单位:军事医学科学院
  • 国际刊号:1674-9960
  • 国内刊号:11-5950/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
军事医学杂志2010年第01期

荧光定量PCR快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立

苏裕心;高姗;康琳;赵耀;郑学礼;王景林

关键词:金黄色葡萄球菌, 实时定量PCR, 病原体检测, 饮用水, 牛奶
摘要:目的 利用SmartCycler系统建立一种简便、快速的荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称SAU)的方法.方法 根据SAU特异nuc基因设计引物和探针,建立检测体系,并在体系中加入内质控IAC,通过另一个标记不同荧光基团的TaqMan探针来监测IAC.用SAU 6538株污染饮用水和牛奶模拟实际样本,以评价体系的性能.结果 以含nuc片段的线性质粒为模板,反应体系的灵敏度为5 拷贝/μl;以6538株基因组DNA为模板,低检测限为10 fg/μl;用涂平板法计数并10倍梯度稀释的菌液提取DNA为模板,低检测限为50 cfu/ml.建立的定量标准曲线的循环域值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r~2≥0.998),PCR效率E≥96.7%.用SAU 6538污染饮用水和牛奶模拟实际样本,灵敏度可达5×10~2 cfu/25 ml样本.结论 所建立的nuc-IAC荧光定量PCR具有内质控IAC,既能定量检测食物是否被污染,又能监测PCR体系,防止假阴性发生或低估病原菌污染量.