期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
慢病毒载体介导E6AP基因敲低乳腺癌细胞株的构建及其功能检测
陈志达；丁丽华；刘婕；张亚楠；朱杰；罗晓丽；刘国晓；叶棋浓；卫勃
关键词：E6AP, RNA, 小分子干扰, 基因表达, 乳腺肿瘤
摘要：目的：构建E6AP基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体，并检测其对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法利用RNA干扰（RNAi）技术设计并合成两条E6AP基因的siRNA，并将其与siRNA表达载体pSIH-H1连接。经过酶切和测序鉴定成功后，人胚肾细胞293T包装E6AP siRNA的慢病毒，然后感染乳腺癌细胞ZR75-1，建立敲低E6AP表达的稳定细胞株。稳定细胞株建立后通过实时定量PCR（ qRT-PCR）和Western 印迹等方法检测RNAi的干扰效果，并利用细胞生长实验检测E6AP siRNA对乳腺癌细胞生长的影响。结果 DNA测序证明，成功构建了E6AP siRNA的表达载体。实时定量PCR和Western 印迹实验证明，构建的siRNA确能有效抑制E6AP基因的表达，并建立了敲低E6AP表达的稳定细胞株。生长实验表明，E6AP siRNA可有效抑制细胞的生长。结论成功构建E6AP基因的siRNA真核表达载体，转染细胞后能有效地抑制E6AP基因的表达，且抑制细胞ZR75-1的生长。
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