期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
IFN-λ真核表达载体的建立及其表达产物的生物学功能评估
李竞;齐义新;房桂英;李雅琪;周慧敏;刘文宣;胡洁;李全海
关键词:IFN-λ, 真核表达, 抗增殖, 凋亡, 抗病毒
摘要:目的:构建 IFN-λ真核表达体系,检测 IFN-λ基因在真核细胞中的表达,评估真核细胞表达 IFN-λ的抗增殖和抗病毒生物学作用。方法从 poly I∶C 刺激的 HuH-7细胞 mRNA 中克隆 IFN-λ1/2基因全长,并进行 DNA 基因测序;构建 pcDNA3-IFN-λ1/2质粒,酶切鉴定,并将其转染 COS-7细胞,应用 Western 印迹检测 IFN-λ1/2在 COS-7细胞中的表达。COS-7细胞表达的 IFN-λ1/2作用于人食管癌 YES5和 T.Tn 细胞株,CCK-8法检测癌细胞增殖, Western 印迹检测凋亡蛋白 caspase-3的活化,实时荧光定量 PCR 检测 ISG15及 MxA 抗病毒基因表达。结果经PCR、DNA 测序和酶切鉴定,克隆的 IFN-λ1/2基因与 GenBank 公布的序列一致,IFN-λ1/2基因序列正确构建入pcDNA3载体中;在 pcDNA3-IFN-λ1/2转染的 COS-7细胞中检测到 IFN-λ1/2蛋白表达;其表达产物可诱导食管癌细胞增殖抑制、活化凋亡蛋白 caspase-3,并且上调抗病毒 ISG15及 MxA 基因。结论建立了 IFN-λ真核表达体系,即通过 pcDNA3-IFN-λ1/2转染 COS-7细胞实现了 IFN-λ表达;经此体系表达的 IFN-λ具有抗增殖、诱导凋亡及上调抗病毒基因表达的生物学作用;此体系的建立为 IFN-λ的生物学功能研究和临床应用奠定了基础。
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