期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
Poly(A)加尾-RNase H消化-RT-PCR法分析应激诱导生成5′端tRNA半分子
刘荻;付汉江;刘继来;朱捷;郑晓飞
关键词:RNA, 转移, tRNA半分子, poly(A)加尾酶, 逆转录聚合酶链反应, 内切核酸酶类, RNase H, 分析
摘要:目的:建立一种简便、快速检测应激诱导细胞生成的5′端转移RNA( tRNA)半分子的方法。方法提取应激诱导细胞RNA,用poly( A)加尾酶在RNA分子3′端加尾后,加入与待测tRNA的3′端部分序列互补的简并DNA探针杂交,经RNase H消化与DNA探针互补的tRNA序列,再由oligo( dT) n锚定引物进行逆转录获得互补DNA( cDNA),以5′端tRNA半分子和锚定引物的序列为PCR反应的上下游引物,PCR扩增检测5′端tRNA半分子。结果经poly( A)加尾-RNaseH消化-RT-PCR-电泳等步骤,可以实现对5′端tRNA半分子的检测分析。结论 poly ( A)加尾-RNaseH消化-RT-PCR法的建立实现了5′端tRNA半分子的简便、快速检测分析,为tRNA半分子生物学功能研究和检测分析提供了工具。
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