期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
串联杂种泛素结合结构域蛋白（ThUBD）在大肠杆菌中的可溶性高效表达
罗维佳；邓晨；李衍常；高媛；徐平
关键词：ThUBD, 泛素化蛋白, 大肠杆菌, 密码子优化, 融合表达, 蛋白质组学
摘要：目的：提高人工串联杂种泛素结合结构域蛋白（ tandem hybrid UBD， ThUBD）在大肠杆菌中的可溶性表达量，为泛素化蛋白研究提供高效特异的富集方法。方法根据大肠杆菌同义密码子相对频率（ RFSC）表对大肠杆菌的密码子进行分类，计算ThUBD密码子的相对适应度，并根据分析结果对ThUBD的密码子进行优化；诱导表达和蛋白定量检测密码子的优化结果；亲和纯化及泛素化蛋白富集研究检测密码子优化后的ThUBD－S的UbC结合能力。结果根据分析结果优化ThUBD密码子，使得适于大肠杆菌基因表达的密码子从48％增加到75％，并消除了阻碍转录翻译的密码子，其密码子适应指数（CAI）从0．63升高到0．88。密码子优化后的ThUBD其可溶性蛋白ThUBD－S的表达量增加了4倍，达到总蛋白的13．06％。同时，优化后的ThUBD－S可能具有更高的UbC的结合能力。结论 ThUBD的基因序列经过优化后，其在大肠杆菌中的表达量升高4倍左右。同时，序列优化不影响融合蛋白ThUBD在大肠杆菌中的可溶性表达和结合UbC的能力。
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