期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>军事医学杂志
- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
人TR基因真核表达载体的构建
营孙阳；熊加秀；麦洪旭；林佳佳；姜丽娜；程龙；叶棋浓
关键词：端粒酶, hTR, 基因克隆, 真核表达
摘要：目的 构建人端粒酶RNA组分( hTR)的真核表达载体,并对其生物学功能进行初步检测. 方法 以人胚肾293 T细胞RNA逆转录得到的cDNA为模板,采用PCR技术扩增出hTR编码序列,将其插入到pCDNA 3 .0载体中;将重组质粒与空载体分别转染293T细胞,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测其表达情况,在HepG2细胞中构建此基因的稳定细胞系并用qRT-PCR检测其效果,通过RNA结合免疫共沉淀( RIP )实验验证其和人端粒酶逆转录酶( hTERT )及角化不良蛋白( dyskerin )的相互作用,通过端粒酶重复序列扩增技术( telomerase repeat amplification protocol ,TRAP)检测过表达hTR后HepG2细胞的端粒酶活性. 结果 双酶切和测序结果表明,pCDNA3.0-hTR的真核表达载体构建成功;转染293T细胞用qRT-PCR证明成功表达;qRT-PCR证实HepG2 pCDNA3.0-hTR稳定细胞系筛选成功;RIP实验证实了hTR与hTERT和角化不良蛋白之间存在相互作用;TRAP实验发现过表达hTR并不影响HepG2细胞的端粒酶活性. 结论 成功构建了pCDNA 3.0-hTR真核表达载体,为进一步研究以针对hTR为靶标的癌症治疗奠定了基础.
友情链接