期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
肠出血性大肠杆菌z5150毒素基因在细胞黏附过程中的作用
何志利;谭琳琳;王建新;李崭;陈芳红;李涛;王慧
关键词:肠出血性大肠杆菌, Red重组系统, 毒素, RelE, 致病性
摘要:目的 通过体内过度表达验证z5150基因毒性,利用Red重组系统构建肠出血性大肠杆菌(EHEC)z5150基因缺失突变株并探究其致病力.方法 在菌体内过度表达z5150基因,测定细菌生长曲线验证其毒性.应用PCR技术扩增出含有卡那霉素抗性基因的目的基因上下游同源臂片段,电转入含有pKD46质粒的EHEC中,在阿拉伯糖诱导下使打靶片段重组到基因组.卡那霉素基因的两端包含FRT位点,pFLP2质粒可介导FLP位点专一性重组去除抗性标记.经DNA测序验证目的基因缺失后,通过菌株感染HT29细胞和BALB/c雌鼠检测缺失株细胞黏附能力和毒力的改变.结果与结论 成功构建EHEC△z5150缺失突变株.z5150的缺失不影响细菌的正常生长,但过度表达后明显抑制细菌生长,发挥毒素效应.与野生株相比,EHEC△z5150缺失突变株对肠上皮细胞黏附能力明显增强;小鼠致死率增高,提示其致病力增强.该研究为EHEC基因功能研究提供了基因敲除技术,证明了RelE家族z5150参与EHEC细胞黏附,并增强菌株毒力,为进一步研究EHEC致病机制奠定了基础.
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