期刊简介
本刊（中国自然科学核心期刊）系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主，选登部分研究简报，技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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首页>军事医学杂志
- 杂志名称：军事医学杂志
- 主管单位：军事医学科学院
- 主办单位：军事医学科学院
- 国际刊号：1674-9960
- 国内刊号：11-5950/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国自然科学核心期刊期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
Bacteroides coprocola菌 β-葡萄糖苷酶基因的表达纯化及活性测定
韩洋；路迪；钱露；邢雅玲；应晓敏
关键词：拟杆菌属, β-葡萄糖苷酶基因, 原核表达, 蛋白纯化, 活性检测
摘要：目的 构建一种拟杆菌Bacteroides coprocola(BC)β-葡萄糖苷酶基因的原核表达载体,并纯化该 β-葡萄糖苷酶,检测其水解不同底物的能力.方法 以NCBI数据库中提供的BC菌 β-葡萄糖苷酶基因序列为参考,合成出该基因的全长序列,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-4T-1中;以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;SDS-PAGE和Western印迹检测 β-葡萄糖苷酶基因的表达,并通过不同底物检测其活性及比较各法的优劣.结果 PCR扩增结果与双酶切实验表明,原核表达载体构建成功;Western印迹结果显示,β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中特异表达;酶活性实验表明,该菌 β-葡萄糖苷酶在对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(4′-nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside,pNPG)和京尼平苷(geniposide)中均有活性,且用pNPG作为底物测定的活性结果更可靠.结论 用两种底物成功检测出纯化的BC菌 β-葡萄糖苷酶的活性,为进一步研究其功能奠定了基础.
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