期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
乳酸脱氢酶B基因的克隆及其活性分析
叶天星;刘婕;程龙;张学武
关键词:乳酸脱氢酶类, 克隆, 真核表达, 肿瘤细胞
摘要:目的 构建带Flag标签的乳酸脱氢酶B(lactate dehydrogenase B,LDHB)基因的真核表达载体,鉴定其表达产物的生物学活性.方法 采用PCR技术从人乳腺文库扩增LDHB基因,将其克隆到pCDH-EF1-MCS-T2A-puro载体中,酶切和测序验证后,转染人胚肾293 T细胞,通过蛋白质免疫印迹鉴定其表达;转染人肝癌HepG2细胞,采用酶和底物反应的方法检测乳酸含量,并通过生长曲线研究LDHB对肝癌细胞生长的影响.结果 将人乳腺文库扩增得到约1000 bp的cDNA片段克隆到pCDH-EF1-MCS-T2A-puro载体上,测序结果与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,LDHB基因表达成功;乳酸含量测定结果显示,LDHB促进了肝癌细胞乳酸的生成;还可促进肝癌细胞的生长.结论 成功构建了pCDH-Flag-LDHB真核表达载体,表达的LDHB具有生物学活性,为进一步研究LDHB在低氧和肿瘤发生发展中的功能奠定了良好基础.
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