期刊简介
本刊(中国自然科学核心期刊)系军事医学科学院主办的国内外公开发行的综合性学术期刊。本刊以刊登军事医学及相关学科的创新性论著为主,选登部分研究简报,技术方法及有一定指导性的文献综述。内容涉及放射医学、微生物学与流行病学、药理学与毒理学、药物化学、基础医学、卫生学与环境医学、卫生装备、临床医学及医学高新技术等领域。
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- 杂志名称:军事医学杂志
- 主管单位:军事医学科学院
- 主办单位:军事医学科学院
- 国际刊号:1674-9960
- 国内刊号:11-5950/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国自然科学核心期刊期刊收录:知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
大肠杆菌htrA突变株构建及其在鼠疫拟菌颗粒疫苗制备中的应用
李璐;刘万兵;周亚洲;纪宇欣;周冬生;杨瑞馥;王效义
关键词:乳酸乳球菌, 拟菌颗粒疫苗, 鼠疫耶尔森菌, F1抗原, 大肠杆菌htrA突变株
摘要:目的 基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗.方法 基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htrA基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至pET-28 a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入到BL-21大肠杆菌野生株和其htrA基因缺失突变株中构建F1-PA融合蛋白表达菌株;SDS-PAGE电泳分析F1-PA融合蛋白表达;镍柱亲和层析纯化包涵体蛋白,梯度稀释透析法复性F1-PA融合蛋白;乳酸乳球菌经热酸处理制备拟菌颗粒;革兰染色和透射电镜分析拟菌颗粒的形态;拟菌颗粒分别与F1-PA融合蛋白或F1蛋白共孵育制备拟菌颗粒疫苗.结果 F1-PA融合蛋白在大肠杆菌野生株和htrA缺失突变株中均以包涵体形式表达.拟菌颗粒对F1-Pa融合蛋白的吸附能力明显高于对F1蛋白的吸附能力.F1-PA融合蛋白在大肠杆菌htrA突变株中的表达量明显高于在野生株中的表达量.结论 大肠杆菌htrA突变株用于表达F1-PA融合蛋白优于野生株.借助于肽聚糖锚钩蛋白,可将鼠疫菌F1抗原结合到乳酸乳球菌拟菌颗粒上制备鼠疫拟菌颗粒疫苗.
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